芍药苷上调lncRNA MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进人类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡
目的 探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1的小干扰RNA(si-MALAT1)片段,脂质体转染48 h后,实时定量PCR检测筛选出敲除效果最佳si-MALAT1.将细胞分对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组、PAE联合si-MALAT1组.敲低MALAT1表达后,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测各组Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl2)、Bcl2 相关 X 蛋白(BAX)的 mRNA 表达;Western blot 法检测各组 Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX的蛋白表达.结果 不同浓度PAE对RA-FLS均有抑制作用,相同浓度RA-FLS活力呈时间依赖性下降;与FLS对照组相比,RA-FLS组MALAT1表达下调,经PAE处理后细胞凋亡率增加;RA-FLS中si-MALAT1组细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组显著增高;PAE组较对照组Bcl2、Wnt1、β-catenin的mRNA表达降低,caspase-3、caspase-9、BAX的mRNA表达则升高;si-MALAT1组的Bcl2表达显著增高,PAE联合si-MALAT1组的Bcl2表达则显著下调,BAX、caspase-3、caspase-9表达显著升高.结论 PAE通过上调MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进RA-FLS凋亡.
芍药苷、长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)、Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)、细胞凋亡
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R285.5;R593.22;R392.1(中药学)
国家中医药管理局重点专科建设项目2007ZDZB001
2022-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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