LRG47/EBP50重组慢病毒靶向载体疫苗增强RAW264.7小鼠巨噬细胞的抗结核免疫及机制
目的 构建免疫相关p47 GTP酶/埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白结合磷蛋白50(LRG47/EBP50)基因共表达重组慢病毒靶向载体,探讨该基因疫苗在抗结核免疫中的作用.方法 利用分子克隆技术构建重组慢病毒质粒载体pLenti-EBP50-LRG47,包装成慢病毒LV-EBP50-LRG47后,H37Rv菌株感染RAW264.7小鼠巨噬细胞.荷菌量计数检测各组杀菌能力,流式细胞术检测巨噬细胞的自噬和凋亡水平,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达,紫外分光光度计法检测一氧化氮(NO)的表达水平.结果 重组慢病毒LV-EBP50-LRG47感染巨噬细胞后,可成功过表达EBP50和LRG47,与对照组相比,LV-EBP50-LRG47可显著抑制胞内H37Rv的生长,LV-EBP50-LRG47感染巨噬细胞自噬和凋亡水平显著上调,iNOS和NO表达水平显著上调.结论 LRG47/EBP50共表达的巨噬细胞自噬、凋亡增强,iNOS、NO产生增加,显著抑制胞内H37Rv的生长.
免疫相关p47 GTP酶(LRG47)、埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白结合磷蛋白50(EBP50)、结核分枝杆菌(MTB)、巨噬细胞、自噬、凋亡、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)
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R378.91+1;R392-33;Q25(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金;江西省自然科学基金;江西省卫生健康委员会科技计划;江西省卫生健康委员会科技计划
2022-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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