青蒿素联合氯喹治疗通过阻断NF-κB通路抑制胶原蛋白诱导性关节炎小鼠的炎症反应
目的 探究青蒿素联合氯喹对胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠前爪厚度、促炎酶含量、巨噬细胞浸润和分化的影响以及作用机制.方法 小鼠注射牛Ⅱ型胶原蛋白建立CIA模型,随机分为CIA组、青蒿素(33.3 mg/kg)组、氯喹(33.3 mg/kg)组和联合治疗组(各16.7 mg/kg),健康小鼠作为对照组,每组8只.治疗组灌胃给药,CIA模型组和对照组给予相同剂量的生理盐水,连续灌胃18 d.记录各组小鼠前爪厚度和关节炎评分的变化,ELISA检测小鼠血清中的免疫球蛋白含量和炎症因子含量.实时定量PCR检测小鼠前爪组织以及巨噬细胞环加氧酶2(COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、CD80、CD163、精氨酸酶1(Arg1)、CC趋化因子受体2(CCR2)、CCR3、CCR4、CCR5、白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达;Western blot法检测小鼠前爪组织和RAW264.7巨噬细胞COX2、iNOS、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达.脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞诱发炎症,将细胞随机分为LPS组、青蒿素(20 μmol/L)组、氯喹(20 μmol/L)组和联合治疗组(青蒿素5 μmol/L,氯喹10 μmol/L)组,未处理细胞为对照组,CCK-8法检测细胞活力.结果 与对照组相比,CIA组小鼠显著增加关节炎评分和前爪厚度,上调M1分化蛋白CD86和CD80 mRNA水平,但下调M2分化蛋白CD163和Arg1/iNOS mRNA水平以及酶COX2和iNOS mRNA和蛋白水平;药物单独以及联合治疗均降低炎症评分和前爪厚度,下调CD86和CD80 mRNA水平,但上调CD163和Arg1/iNOS mRNA水平和COX2和iNOS的mRNA和蛋白水平;LPS诱导的巨噬细胞细胞活力增加,药物处理后细胞活力降低.CIA小鼠前爪组织或LPS诱导的巨噬细胞的IL-6mRNA水平、p-STAT3和NF-κB p65的蛋白表达量均上调,治疗则均可逆转上述作用.结论 青蒿素联合氯喹的治疗效果优于药物单药治疗的效果;青蒿素联合氯喹通过阻断NF-κB通路缓解CIA小鼠关节炎.
青蒿素、氯喹、胶原蛋白诱导性关节炎、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、核因子κB p65(NF-κB p65)
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R285.5;R593.22;R684.3;R392-33(中药学)
陕西省重点研发计划项目2019SF-194
2022-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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