重组表达丙型肝炎病毒非结构蛋白2(NS2)及其血清抗NS2抗体检测方法的建立与评价
目的 重组表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2),建立并评价基于化学发光法的血清抗NS2抗体的检测方法.方法 以HCV 1b基因型的NS2核苷酸序列质粒(PUC-NS2)为模板,构建包含NS2全序列的重组质粒(pGEX-KG-NS2);诱导NS2蛋白原核表达,将纯化后的NS2融合蛋白包被于微孔板,基于化学发光法制备抗NS2抗体检测试剂盒,并对其方法学指标进行评价.结果 成功诱导获得相对分子质量(Mr)约51 000的NS2融合蛋白;并制备血清抗NS2抗体检测试剂盒,试剂盒方法学评价:精密度试验(批内变异系数4.60％～9.17％,批间变异系数6.62％～10.09％)结果良好,空白限和检出限的相对发光强度比值(RLIR)分别为1.57、4.80(r=0.9870),分析测量范围(AMR)为1.63～44.50 RLIR;准确度试验:平均回收率为99.4％,类风湿因子等阳性血清标本对本试验无交叉反应,试剂盒15个月内稳定,45例HCV感染者血清抗NS2抗体阳性率为20％(9/45).结论 获得了原核表达的HCV NS2并制备了检测血清抗NS2抗体的试剂盒.
丙型肝炎病毒(HCV)、非结构蛋白2(NS2)、抗NS2抗体
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R512.6+3;R373.2(传染病)
南京军区医学科技创新重大专项基金;浙江省杭州市科技局社会发展科研项目;浙江省医药卫生科研项目;浙江省医药卫生科研项目;浙江省自然科学基金公益技术研究计划项目;国家发明专利
2022-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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