肠道病毒71型衣壳蛋白1(VP1)单克隆抗体制备

摘要：

目的 制备肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白1(VP1)小鼠源性单克隆抗体(mAb).方法 表达并纯化VP1蛋白;以灭活并纯化的EV71病毒免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得抗EV71 VP1的mAb;使用间接ELISA进行抗体效价检测、抗体亚类鉴定,Western blot法检测EV71感染的RD细胞VP1蛋白表达,免疫荧光细胞化学技术检测EV71感染的RD细胞VP1的表达和分布,体外中和试验测定抗体的中和活性.结果 共获得6株可分泌针对EV71 VP1的mAb的杂交瘤细胞株,获得的6株抗体中3株为IgG2a亚型,3株为IgG2b,可用于ELISA、Western blot法、免疫荧光细胞化学染色,其中2D7具有中和活性,半数抑制剂量(IC50)为9.892μg/mL.结论 获得6株具有较好反应性的mAb,为后续EV71鉴定、诊断和VP1蛋白功能研究等奠定了基础.

关键词：肠道病毒71型(EV71)、单克隆抗体(mAb)、衣壳蛋白1(VP1)、中和活性

所属期刊栏目：38

分类号：Q813.2;R392.33(生物工程学(生物技术))

资助基金：陕西省重点研发计划2020SF-227

在线出版日期：2022-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：268-274