小鼠抗人肿瘤抑制素2(ST2)单克隆抗体的制备及应用
目的 制备针对人肿瘤抑制素2(ST2)的小鼠源性单克隆抗体,并进行功能和应用的初步鉴定.方法 用真核表达的重组人ST2分子免疫BALB/c小鼠,利用常规B细胞杂交瘤技术制备抗ST2单克隆抗体,并鉴定其在Western blot法、免疫组织化学染色和流式细胞术中的应用价值;建立检测可溶性ST2的夹心ELISA,检测热射病患者血清ST2水平;建立ST2萤光素酶报告基因检测系统,检测特异性抗体的中和活性.结果 获得38株分泌小鼠抗人ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,克隆号分别命名XA325.1～XA325.38.初步筛选鉴定发现可以用于Western blot法、免疫组织化学染色,识别重组表达的纯化蛋白和细胞中表达的ST2;有2株可以应用于流式细胞术,识别细胞表面外源性转染表达的ST2;采用单抗XA325.16包被,搭配XA325.5标记生物素,可以建立检测血清中可溶性ST2的ELISA试剂盒,发现热射病患者血清ST2水平显著升高;XA325.5具有中和活性,可以阻断白细胞介素33(IL-33)的生物学效应.结论 制备小鼠抗人ST2的单克隆抗体,可用于多种免疫学检测技术,XA325.5中和活性抗体具有潜在的临床应用价值.
肿瘤抑制素2(ST2);单克隆抗体(mAb);中和抗体;免疫学检验方法
37
Q813.2;R392;R392.12;R446.61(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金;后勤保障部项目
2022-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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