长链非编码RNA CRNDE通过下调miR-136-5p表达并上调MCM5表达促进U937细胞增殖并抑制其凋亡
目的 探究长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对U937细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其作用机制.方法 首先通过基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析CRNDE在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达水平;实时荧光定量PCR检测AML细胞系miR-136-5p、CRNDE及微小染色体维持蛋白5(MCM5)的mRNA表达水平.构建敲低CRNDE的慢病毒载体并转染U937细胞,设为敲低CRNDE组(sh-CRNDE组)和阴性对照组(sh-NC组);分别转染miR-136-5p模拟物(miR-136-5p mimic)和miR-136-5p抑制物(miR-136-5p inhibitor)对U937细胞中的miR-136-5p进行过表达和敲低,设为miR-136-5p过表达组(miR-136-5p-mimic)、过表达阴性对照组(NC-mimic)、miR-136-5p敲低组(miR-136-5 p-inhibitor)和敲低阴性对照组(NC-inhibitor).CCK-8法和细胞计数试验检测CRNDE和miR-136-5p对细胞增殖的影响,流式细胞术检测CRNDE和miR-136-5p对细胞周期和凋亡的影响.实时荧光定量PCR检测miR-136-5p、CRNDE及MCM5的mRNA表达,Western blot法检测MCM5、P53、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的蛋白表达水平.结果 CRNDE在AML患者骨髓和细胞系中高表达.敲低CRNDE可以上调miR-136-5p,抑制MCM5 mRNA和蛋白表达,抑制细胞增殖,促进凋亡并使细胞周期阻滞在G1期.过表达miR-136-5p也可抑制MCM5核酸和蛋白水平表达.而敲低miR-136-5p则可以逆转以上作用.结论 CRNDE通过下调miR-136-Sp和上调MCM5表达,进而促进U937细胞增殖并抑制其凋亡.
急性髓系白血病;长链非编码RNA(lncRNA);结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE);miR-136-5p;微小染色体维持蛋白5(MCM5)
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R733.71;R733.73;R392-33(肿瘤学)
国家自然科学基金;生物治疗国家重点实验室资助课题
2022-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
987-995
