尿石素A(urolithin A)通过激活Nrf2通路和自噬抑制高脂诱导的肝细胞炎症反应及氧化应激
目的 研究尿石素A(UA)对高脂诱导的肝细胞炎症以及脂肪堆积的作用及机制.方法 采用核因子E2相关因子2(Nrf2)短发夹RNA (shRNA)慢病毒感染,建立稳定敲减Nrf2的L02肝细胞系.空载体对照细胞及敲低Nrf2的L02细胞给予游离脂肪酸(FFA)建立高脂细胞模型、BODIPY493/503染色检测细胞内脂肪沉积情况,在此基础上给与UA处理.分为对照组、0.6 mmol/L FFA处理组、0.6 mmol/L FFA联合10 μmol/L UA处理组、0.6 mmol/L FFA联合20 μmol/L UA处理组,均处理48 h.甘油三酯检测试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)水平,ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白细胞介素6(IL-6)水平;采用二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平;采用试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)水平、总超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化氢酶(CAT)活性;实时定量PCR检测SOD2和CAT的mRNA水平,Western blot法检测SOD2、CAT、Nrf2以及P62、微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白水平.采用红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-LC3(RFP-GFP-LC3)腺病毒感染细胞,检测自噬通量水平.结果 FFA增加L02细胞内TNF-α、IL-6水平以及TG含量和细胞内脂肪沉积,细胞内MDA和ROS水平增加,SOD2、CAT、Nrf2的mRNA和蛋白表达降低;FFA处理降低细胞LC3-Ⅱ水平,增加P62水平,阻断自噬通量.UA处理可逆转FFA以上作用,敲低Nrf2能够逆转UA的上述作用.结论 UA通过激活Nrf2介导的细胞抗氧化以及自噬通路,缓解高脂诱导的肝细胞炎症反应和氧化应激.
尿石素A(urolithin A);炎症反应;脂肪变;核因子E2相关因子2(Nrf2);氧化应激;自噬
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R392.11;R392-33;R364.2;R965
国家自然科学基金;陕西省科技厅社会发展领域项目;陕西省科技厅社会发展领域项目;陕西中医药大学慢性非传染性疾病创新团队
2022-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
973-980
