乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞通过产生IL-17D诱导初始CD4+T细胞免疫衰老

摘要：

目的 探讨乳腺癌组织分离的γδ1 T细胞诱导免疫衰老发挥免疫抑制作用及其逆转的机制.方法 乳腺癌组织分离出的γδ1 T细胞与健康人外周血分离的初始CD4+T细胞共培养后,采用CCK-8法检测初始CD4+T细胞的增殖能力,衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测初始CD4+T细胞的衰老;诱导获得的衰老CD4+T细胞与健康人外周血来源初始CD4+T细胞共培养后,通过CCK-8法检测处理后CD4+T细胞的增殖,以流式细胞仪检测处理后CD4+T细胞的凋亡,SA-β-Gal染色检测处理后CD4+T细胞的衰老,Western blot法检测处理后CD4+T细胞周期相关蛋白P53、P21、P16的表达;γδ1 T细胞与初始CD4+T细胞共培养后,利用细胞因子芯片法分析上清中抑制性细胞因子白细胞介素17D(IL-17D)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子α(TGF-α)等的表达差异;IL-17D单克隆抗体处理乳腺癌γδ1 T细胞与初始CD4+T细胞共培养体系后,通过CCK-8法检测处理后CD4+T细胞增殖能力的变化;通过ELISA检测Toll样受体8(TLR8)的配体单链RNA40(ssRNA40)及TLR8短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体对γδ1 T细胞分泌细胞因子IL-17D浓度的影响,通过SA-β-Gal染色、Western blot法分析验证ssRNA40对γδ1 T细胞诱导免疫衰老作用的影响.结果 乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞诱导初始CD4+T细胞发生免疫衰老,且衰老CD4+T细胞进一步发挥免疫抑制作用;细胞因子芯片检测结果表明γδ1 T细胞的分泌上清中的抑制性因子中IL-17D含量最高;IL-17D单克隆抗体可以降低γδ1 T细胞对初始CD4+T细胞的增殖抑制作用;TLR8配体ssRNA40可以抑制γδ1 T细胞分泌IL-17D,进而可以部分逆转γδ1 T细胞对初始CD4+T细胞的增殖抑制及免疫衰老诱导.结论 乳腺癌组织来源的γδ1 T细胞通过产生IL-17D诱导初始CD4+T细胞免疫衰老发挥免疫抑制作用;ssRNA40通过降低γδ1 T细胞分泌IL-17D,可以部分逆转γδ1 T细胞对初始CD4+T细胞免疫衰老的诱导作用.

关键词：乳腺癌、γδ1 T细胞、免疫衰老、免疫抑制、IL-17D

所属期刊栏目：37

分类号：R392.1;R737.9;R392.12;R392-33

资助基金：山东省自然科学基金ZR2017MH059

在线出版日期：2021-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：623-632