兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体.方法 构建pET-22b-SAS1 B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达.用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SAS1B多克隆抗体.ELISA检测SAS1B抗体效价,Western blot和免疫组织化学法鉴定SAS1B抗体特异性.结果 在构建pET-22b-SAS1B-His原核表达载体的基础上,在BL21(DE3)细胞成功诱导表达SAS1B重组蛋白.制备的兔抗人SAS1B多克隆抗体效价为1:51200.SAS1B多克隆抗体能与SAS1B重组蛋白特异结合且能识别乳腺癌组织中的SAS1B蛋白.结论 成功制备具有较好特异性的兔抗人SAS1B多克隆抗体.

关键词：精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)、原核表达、蛋白纯化、多克隆抗体

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分类号：R392.1;Q785;Q511

资助基金：国家自然科学基金;内蒙古自然科学基金;内蒙古教育厅科研项目;内蒙古自治区科技厅重点实验室项目

在线出版日期：2021-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：362-367