应用高效电融合技术制备小鼠抗人vasorin(VASN)单克隆抗体

摘要：

目的 通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定.方法 以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆.通过ELISA检测抗体的效价及亲和力、Western blot法检测抗体能否识别HepG2细胞中VASN蛋白.结果 在脾细胞与Sp2/0细胞的比例为2∶1,交变电场场强50 V 2 MHz 20 s,直流脉冲强度500 V 0.5 s时,融合率达0.31％.获得2株小鼠抗人VASN单克隆抗体(4H1和8B9),抗体最高效价为1∶256 000,亲和力最高可达到4.9×106 L/mol;2株抗体均可识别HepG2细胞的VASN蛋白.结论 运用细胞电融合法成功制备2株小鼠抗人VASN的单克隆抗体.

关键词：肝细胞癌、vasorin(VASN)、电融合、单克隆抗体

所属期刊栏目：37

分类号：R735.7;R392;R392-33(肿瘤学)

资助基金：吉林省科技厅技术攻关项目;吉林省科技厅项目;吉林省大学生创新创业训练项目

在线出版日期：2021-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：265-270