表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)单链抗体亲和力检测的间接ELISA的建立及优化

摘要：

目的 建立检测表皮生长因子受体变体Ⅲ(EGFRvⅢ)单链抗体PD0721亲和力检测的ELISA,并且对实验条件进行优化.方法 利用本课题组制备的单链抗体PD0721,建立检测PD0721单链抗体亲和力的间接ELISA,并采用棋盘滴定法对实验条件中的抗体抗原浓度、二抗浓度、包被条件等方面进行优化,对本方法的灵敏度及精密度进行考察.结果 使用PBS稀释抗原至1.25 mg/L于4℃包被12 h,加入120 ng/mL PD0721单链抗体以及1∶8000的酶标抗体为最佳检测结果.优化后的结果,在PD0721单链抗体浓度为15 ng/mL～480 ng/mL范围内回归模型拟合效果良好,最低检测限为7.5 ng/mL.组内差异系数为0.11％ ～0.99％,组间差异系数为0.68％ ～ 3.15％.结论 建立了能准确、稳定检测PD0721单链抗体亲和力的间接ELISA.

关键词：表皮生长因子受体变体Ⅲ(EGFRvⅢ)、PD0721、间接ELISA、单链抗体

所属期刊栏目：37

分类号：R446.61;R392.11;Q511(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技计划;贵州省科学技术厅人才团队项目;科技专项

在线出版日期：2021-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：73-78