不同毒力的分枝杆菌感染促进小鼠RAW264.7巨噬细胞自噬及mTOR和AKT磷酸化
目的 探讨不同毒力分枝杆菌感染对巨噬细胞自噬水平的影响.方法 分别用表达绿色荧光蛋白(GFP)的结核分枝杆菌标准株H37Rv、卡介苗(BCG)和耻垢分枝杆菌Ms1-2c株(Ms)感染小鼠RAW264.7巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞的自噬水平,激光共聚焦显微镜观察细胞内吞噬体与溶酶体的共定位,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白表达.结果 与对照组相比,RAW264.7巨噬细胞感染H37Rv、BCG和Ms24h后,感染组的自噬水平均显著增加,Ms感染组的自噬水平最高;各感染组的LC3-Ⅱ蛋白表达均上调,H37Rv、BCG和Ms感染的细胞内吞噬体与溶酶体的共定位率分别为(11.33 ±0.88)%、(18.33 ±0.88)%和(48.67 ±0.66)%,Ms感染组的分枝杆菌与溶酶体共定位最明显.分枝杆菌感染巨噬细胞后,mTOR和AKT表达无明显改变,但其磷酸化水平均显著升高.结论 分枝杆菌感染诱导巨噬细胞发生自噬,同时促进mTOR和AKT的磷酸化.
分枝杆菌、巨噬细胞、自噬、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、蛋白激酶B(AKT)
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Q939.13+1;R378.91;R392-33(微生物学)
国家自然科学基金地区基金;江西省自然科学基金;江西省卫生健康委员会科技计划
2021-03-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1057-1062