利用Cre-loxP系统研究细胞间mRNA的传递

摘要：

目的 利用Cre-loxP重组酶系统研究mRNA在细胞间传递过程及意义.方法 构建和筛选稳定表达Cre重组酶的供体细胞及稳定表达loxP-DsRed-loxP-eGFP的受体细胞.将供、受体细胞共培养或在TranswellTM中共培养,设置单独受体细胞组为对照,72 h后观察统计各组受体细胞eGFP阳性率,利用细胞免疫荧光细胞染色检测eGFP阳性细胞中Cre表达情况,并探讨供体细胞死亡、细胞膜纳米管、Rho相关激酶(ROCK)信号通路对Cre mRNA传递的影响.结果 将供、受体细胞共培养72 h后发现,共培养组eGFP为阳性,单独受体细胞组、TranswellTM共培养组eGFP均为阴性,表明细胞接触可以介导Cre mRNA传递,免疫荧光染色结果显示Cre蛋白可在受体细胞中翻译和入核.此外,Cre mRNA的传递主要通过活细胞,而膜纳米管及ROCK信号通路抑制剂可部分阻滞该过程.结论 mRNA可以通过细胞间接触在活细胞中传递,进入受体细胞后还可翻译成蛋白质发挥生物学功能.

关键词：细胞接触、mRNA传递、Cre-loxP重组酶系统、膜纳米管

所属期刊栏目：36

分类号：Q813.1+1;R392.12(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金;中国博士后科学基金

在线出版日期：2020-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：769-775