阿奇霉素单克隆抗体的制备及其免疫检测方法的建立
目的 将阿奇霉素(AZM)通过衍生形成半抗原,制备小鼠抗阿奇霉素单克隆抗体(mAb),初步鉴定其特性.方法 采用活性酯法使AZM与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原AZM-BSA和检测抗原AZM-OVA.用AZM-BSA免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得杂交瘤细胞株50D10.将该细胞株注射BALB/c小鼠制备AZM mAb,并以此mAb建立ELISA检测AZM的方法.结果 AZM mAb的效价为1∶4.0×105,属于IgG1型.建立的间接竞争ELISA (icELISA)灵敏度为0.287 μg/L,半数抑制浓度(IC50)为1.33 μg/L.AZM mAb与红霉素、罗红霉素、多拉菌素、克拉霉素、替米考星和泰乐菌素的交叉反应率均小于0.1%.牛奶中AZM的添加回收率在79.6%~ 104.1%之间,变异系数在16.4%~27.3%之间.结论 制备出灵敏度高、特异性强的AZM mAb,为AZM的快速检测方法的建立奠定了基础.
阿奇霉素、单克隆抗体、ELISA
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R392-33;R446.61;R978.1
2020-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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