小鼠脑微血管内皮细胞的原代培养与鉴定

摘要：

目的 探索和建立一种纯度高、操作简单且重复性强的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法.方法 通过剪碎、过细胞筛网等物理方法,结合白蛋白密度梯度离心及化学酶消化法,并以严格控制1 g/L Ⅱ型胶原蛋白酶消化作用时间15～20 min为首要,从2～3周龄ICR小鼠脑组织中分离培养出小鼠脑微血管内皮细胞.通过细胞形态学观察和免疫细胞化学染色检测Ⅷ因子相关抗原鉴定所培养的细胞.结果 接种24h,贴壁的血管段周围爬出多角形或短梭状细胞,并逐渐扩散成团簇状;7d后细胞融合,呈典型的单层、“铺路石样”镶嵌式排列.Ⅷ因子相关抗原细胞免疫化学染色鉴定为阳性,胞质呈棕红色,内皮细胞纯度达95％以上.结论 成功建立了一种操作简单、重复性强、目的细胞纯度高的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法.

关键词：脑微血管内皮细胞、原代培养、Ⅷ因子相关抗原、免疫细胞化学染色法

所属期刊栏目：36

分类号：R392;R392.12;R392.11

资助基金：国家自然科学基金;福建省自然科学基金

在线出版日期：2020-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：325-329