慢性高糖抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞AKT磷酸化并促进其Ml型极化

摘要：

目的 研究慢性高糖对小鼠巨噬细胞的影响及机制.方法 以正常生长液和含(40 、60)mmol/L葡萄糖的生长液培养小鼠 RAW264.7巨噬细胞 1 、3 、5 、7 d,相差显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot法检测细胞白细胞介素 1β(IL-1β)和 IL-1O蛋白水平,ELISA检测培养细胞上清液 IL-Iβ和 IL,-10分泌量;实时定量 PCR法检测细胞蛋白激酶B(AKT)mRNA水平,Western blot法检测细胞 AKT、磷酸化的 AKT(p-AKT)蛋白水平.结果 60 mmol/L葡萄糖处理 1 d即出现较多长梭形细胞,可见伸展的伪足,且随时间延长数量增加、体积变大;处理 1 d即明显抑制细胞增殖,随时间延长抑制效果有所改善;处理 3,5,7d后,IL-1 β蛋白水平增加、IL-10蛋白水平降低;处理 1 d后 IL-1β分泌显著增加,但处理3d后 IL-10分泌显著减少且随时间延长进一步减少;处理 3,5,7 d 后,AKT蛋白磷酸化被抑制,但 AKT mRNA水平未见明显变化.40 mmol/L葡萄糖处理在一定程度上发挥作用,但不如 60 mmol/L葡萄糖显著和稳定.结论 长期高糖刺激诱导巨噬细胞向促炎性 M1型转变,诱发巨噬细胞的持续慢性炎症反应,其机制可能与抑制 AKT蛋白磷酸化激活有关.

关键词：糖尿病、慢性炎症、RAW264.7细胞、巨噬细胞极化

所属期刊栏目：35

分类号：R392.1;R587.1;R364.5;R965

资助基金：江苏省高校自然科学研究面上项目18KJB180013

在线出版日期：2020-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：910-917