组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)抑制剂通过抑制核因子κB减轻乙醇诱导的人肠上皮Caco-2细胞损伤
目的 研究组蛋白去乙酿化酶 3(HDAC3)在酒精诱导的肠上皮细胞炎症和通透性中的作用和机制.方法 培养Caco-2细胞达到分化,采用(10、25 、50 、100、200)mmol/L 乙醇对其进行处理,通过噻唑蓝(MTT法)检测乙醇对细胞活性的影响,实时定量PCR检测 Caco-2细胞HDAC3 mRNA水平,Western blot法检测其蛋白水平,从中筛选出适宜的乙醇浓度.将分化的 Caco-2细胞分为对照组、乙醇组(50 mmol/L乙醇处理60min)和 RGFP966预处理组(乙醇处理前用 2μmol/L HDAC3抑制剂 RGFI珍66预处理 1 h).EUSA检测培养的细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,电阻仪检测跨上皮电阻值(TER),Western blot法检测细胞中闭合蛋白(occludin)、密封蛋白 1(claudin-1)以及磷酸化的核因子 κBp65(p-NF-κBp65)、核因子 κB抑制蛋白(IκB)的蛋白水平.结果 (10、25 、50)mmol/L乙醇对细胞活力无明显影响,这些浓度的乙醇处理后 HDAC3 mRNA和蛋白表达均升高,且具有剂量依赖性.与对照组相比,乙醇处理组细胞 TNF-α含量和 p-NF-κBp65蛋白水平增加,TER值与occludin、claudin-1和 IκB蛋白水平均降低;与乙醇处理组相比,RGFP966预处理组细胞 TNF-α含量和 p-NF-κBp65蛋白水平均降低,TER值与 occludin、claudin-1和 IκB蛋白水平均增加.结论 抑制 HDAC3能够减弱乙醇诱导的肠上皮细胞炎症和通透性,可能是通过抑制 NF-κB的活化发挥作用的.
组蛋白去乙酸化酶3(HDAC3)、乙醇、肠上皮细胞、炎症、通透性、核因子κB(NF-κB)
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R392-33;TS262.2;R364.5
陕西省国际科技合作计划项目2018KW-042
2020-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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