金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价

摘要：

目的 为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA (Array-ELISA)检测方法.方法 通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性.结果 采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001～10) ng/mL.在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100％,各型SE之间无交叉反应.同时显示与肉毒毒素也无交叉反应.结论 成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE.

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)、阵列ELISA(Array-ELISA)

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分类号：S852.4+4;R446.61;R378.1+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技重大专项课题2018ZX10711001-003,AWS15J006;病原微生物生物安全国家重点实验室自主基金SKLPBS1816

在线出版日期：2019-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：695-701