叶酸通过DNA甲基化减轻同型半胱氨酸诱导的大鼠心肌细胞损伤
目的 研究同型半胱氨酸(Hcy)对体外培养的大鼠心肌细胞的影响,并分析叶酸对DNA甲基化的作用以探讨叶酸对H9C2心肌细胞Hcy暴露的保护作用及其机制.方法 用(0、0.5、1、2)mmol/L Hcy处理H9C2细胞24h,观察细胞形态,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况;设置2mmol/L Hcy处理组、0.1 mmol/L叶酸联合2mmol/L Hcy处理组、0.1 mmol/L叶酸处理组及DMSO对照组.处理24h,采用以上方法检测细胞活力及细胞凋亡,MethylFlash总DNA甲基化ELISA试剂盒检测DNA甲基化水平,反转录PCR检测DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、DNMT3a、DNMT3b的mRNA水平,Western blot法检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白水平.结果 不同浓度Hcy处理24h的H9C2细胞数随Hcy浓度增大而减少.与对照组相比,2 mmol/L Hcy处理组细胞活力降低、细胞凋亡增加,叶酸联合Hcy处理组细胞数、存活情况较Hcy处理组明显增加;与其余各组相比,Hcy处理组的细胞总凋亡率增加,甲基化水平明显降低,叶酸联合Hcy处理组DNA甲基化水平增加;DNMT1 mRNA水平仅在叶酸处理组明显升高,而DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白水平均未出现明显改变.结论 叶酸能通过DNA甲基化减轻Hcy对大鼠心肌细胞的损伤.
同型胱氨酸血症、心肌细胞、DNA甲基化、叶酸
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R285.4;R392-33;Q563+.8(中药学)
2019-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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