纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备
目的 制备纳尔逊海湾病毒(NBV)S3多克隆抗体.方法 首先将构建好的Pris His MB-S3重组基因质粒,转化到大肠杆菌(E coil) BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达.镍柱亲和层析法纯化目的蛋白以获得大量融合重组蛋白,以此为抗原免疫大鼠制备抗S3多克隆抗体并进行鉴定.结果 Pris His MB-S3蛋白的相对分子质量(Mr)约39 000,以包涵体形式存在,通过免疫大鼠成功制备出NBV S3多克隆抗体.间接ELISA测定抗体效价达1∶64 000.间接免疫荧光实验证明S3蛋白成功在细胞内表达并以颗粒状分布在细胞质内.结论 成功获得高反应性和高特异性的S3蛋白多克隆抗体.
Pris His MB-S3质粒、纳尔逊海湾病毒(NBV)、蛋白纯化、多克隆抗体
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R392.1;R373.3
2019-08-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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