鸭抗病毒蛋白(viperin)在转染的BHK-21细胞表达并抑制鸭坦布苏病毒出芽
目的 探索鸭抗病毒白(viperin)对鸭坦布苏病毒(DTMUV)增殖的影响.方法 使用生物学信息学方法分析鸭viperin基因,构建系统发育树.构建原核表达质粒pGEX-6P-viperin和真核表达质粒pEGFP-N1-viperin,分别转化Rosseta感受态细胞和转染BHK-21细胞.用DTMUV分别感染真核表达质粒和空载体质粒的BHK-21细胞,利用实时荧光定量PCR检测细胞沉淀和上清中DTMUV的含量,利用质谱的方法鉴定增强型绿色荧光蛋白(EGFP)单克隆抗体捕获的结合蛋白.结果 鸭viperin基因与其他种属viperin基因有显著差异.鸭viperin蛋白能成功在BHK-21细胞表达,鸭viperin抑制DTMUV在BHK-21细胞中的出芽.质谱分析结果显示转染真核表达质粒的细胞中可能存在6种影响抑制DTMUV增殖、出芽的蛋白.结论 鸭viperin蛋白可在BHK-21细胞表达,且能抑制鸭坦布苏病毒出芽.
鸭、viperin蛋白、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、质谱分析法
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R392.1;R392-33;Q811.4;S855
科技部国家重点研发计划2018YFD0500100,2016YFD0500805;安徽农业大学研究生创新基金2018yjs-22;兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室自主课题SYZZ2017003
2019-08-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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