810nm弱激光抑制M1型骨髓源性巨噬细胞极化促进脊髓背根神经元轴突生长
目的 研究810 nm弱激光对原代培养M1型骨髓源性巨噬细胞(BMDM)表型极化及分泌对背根神经节(DRG)神经元轴突的作用.方法 分离培养BMDM,经脂多糖(LPS)联合γ干扰素(IFN-γ)诱导BMDM向M1表型极化,采用流式细胞术检测细胞F4/80和CD16/32表达.将诱导成熟的M1型BMDM随机分为弱激光照射组与对照组.照射组分别采用波长810nm,0.4J、4J和10J的弱激光进行照射;对照组不进行照射.照射后24h,反转录PCR法检测M1型BMDM诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA水平,Western blot法检测iNOS的蛋白水平,ELISA检测培养细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的含量,免疫荧光细胞化学染色检测神经元核蛋白(NeuN)和β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)的表达,确定M1型BMDM上清液培养对DRG神经元轴突生长的影响.结果 与对照组相比,各能量参数弱激光照射后24h,M1型BMDMiNOS mRNA水平均显著下调,4J弱激光照射组下调最显著;0.4J及4J弱激光照射组iNOS蛋白水平显著下调,4J弱激光照射组下调水平较0.4J弱激光照射组更显著.4J和10J弱激光照射组M1型BMDMTNF-α的分泌明显减少,各照射组M1型BMDM IL-1 β的分泌明显下调,0.4J及4J弱激光照射组抑制程度较10J弱激光照射组更为显著.4J弱激光照射组明显促进M1型BMDM的BDNF和NGF分泌.采用照射后的BMDM上清液过继培养DRG24h后,4J及10J弱激光照射组上清液可显著促进DRG神经元轴突的生长.结论 弱激光照射可以抑制M1型BMDM表型极化及促炎因子TNF-α、IL-1β分泌,上调神经营养因子BDNF和NGF的分泌,促进DRG神经元轴突的生长,且呈一定的剂量依赖性.
810 nm弱激光、脊髓损伤、M1型巨噬细胞、炎症因子、背根节神经元、轴突
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R364.5;R730.57;R392-33;R392.12(病理学)
国家自然科学基金81871743
2019-08-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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385-392