羊口疮病毒ORF128锚蛋白对HEK293T细胞NF-κB信号通路的调节作用及机制

摘要：

目的 研究羊口疮病毒(ORFV)感染HEK293T宿主细胞后,其编码的锚蛋白ORF128蛋白对宿主核因子κB (NF-κB)信号通路的影响及其机制.方法 将来自ORFV/QH02/2010株的ORF128 DNA序列分别构建至真核表达载体pCMV-tag2B和pEGFP-N1;在病毒感染细胞期间,利用反转录PCR检测ORF128 mRNA水平、激光共聚焦显微镜检测ORF128蛋白的亚细胞定位;利用双荧光素酶报告基因检测系统分析ORF128对NF-κB信号通路的调节作用,Western blot法检测NF-κBp65的核移位以及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白磷酸化水平.结果 ORF128蛋白在病毒感染早期表达且定位于宿主细胞核,ORF128蛋白可抑制NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性;ORF128的表达抑制NF-κBp65的核移位和磷酸化的IκBα (p-IκBα)的降解.结论 ORF128蛋白通过抑制p-IκBα蛋白的降解过程,阻止NF-κBp65蛋白核移位,进而抑制宿主NF-κB信号通路的活化.

关键词：羊口疮病毒(ORFV)、锚蛋白、核因子κB(NF-κB)、羊口疮病毒蛋白128(ORF128)

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分类号：R392-33;S718.85;Q786

资助基金：“十三五”国家重点研发计划项目2017YFD0500903;国家自然科学基金青年项目81501734;甘肃省农业生物技术专项GNSW-2012-16

在线出版日期：2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：243-249