原代大鼠主动脉内皮细胞衰老模型的建立

摘要：

目的 建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H2O2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用.方法 取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD31的表达并进行鉴定.分别应用30 mmol/L葡萄糖(HG)、10 μmol/L AngⅡ、100 μmol/L H2O2、0.5 mmol/L PA处理原代RAEC 24 h.采用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况,实时荧光定量PCR检测衰老相关基因P16mRNA的水平,Western blot法检测衰老相关基因P16、P21、P53蛋白水平;免疫荧光细胞化学染色观察P16的表达,CCK-8法观察细胞存活率.结果 与对照组相比,各处理组RAEC中β-半乳糖苷酶染色细胞增加,以H2O2 PA处理组更明显;HG、AngⅡ、H2O2、PA处理均可增加RAEC的P16 mRNA水平;AngⅡ、H2O2、PA处理均可增强RAEC的P16、P21蛋白水平,以H2O2组最显著.各处理组细胞P16表达均增强,与对照组相比,HG组与AngⅡ组细胞存活率变化不大,H2O2组与PA组细胞存活率显著降低.结论 HG、AngⅡ、H2 O2及PA均可诱导建立RAEC衰老模型,以H2O2诱导衰老作用最强.

关键词：衰老、大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)、原代培养

所属期刊栏目：35

分类号：R392-33;R543.1;Q255;Q95-33

资助基金：国家自然科学基金81774119

在线出版日期：2019-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：230-235