泰妙菌素人工完全抗原的制备及其单克隆抗体的研制

摘要：

目的 研制灵敏度高、特异性好的抗泰妙菌素(TML)单克隆抗体.方法 用肟化法和碳二亚胺法将TML分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫原TML-BSA和包被原TML-OVA,用TML-BSA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合并采用间接ELISA筛选抗TML杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备腹水和辛酸-硫酸铵法纯化获得单克隆抗体,并用SDS-PAGE鉴定.结果 成功筛选出2株杂交瘤细胞株3B3和4A7,其细胞上清效价分别为1∶1600和1∶6400.纯化后单克隆抗体4A7的效价为5.12×105,半数抑制剂量(IC50)为0.049 ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×109 L/mol,与类似物瑞他帕林有2.7％的交叉反应率,与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应.结论 成功研制了抗TML单克隆抗体.

关键词：泰妙菌素、细胞融合、酶联免疫吸附实验、单克隆抗体

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分类号：Q813.2;R392-33(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家科技支撑计划2014BAD13B05;智汇郑州1125计划2015年

在线出版日期：2019-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：174-179