细颗粒物(PM2.5)降低人鼻黏膜上皮细胞闭合蛋白(occludin)的表达
目的 探讨细颗粒物(PM2.5)对人正常鼻黏膜上皮细胞间闭合蛋白(occludin)表达及分布的影响.方法 采用(0、50、100、200、400、500、800、1000) μg/mL PM2.5处理体外培养的正常人HNEpC鼻黏膜上皮细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,确定最佳处理剂量;后续采用(200、400、500) μg/mL PM2.5处理HNEpC细胞,用免疫荧光细胞化学染色法检测细胞occludin的表达和分布情况,实时荧光定量PCR检测occludin的mRNA水平,Western blot法检测occludin蛋白水平.结果 与阴性对照组(0 μg/mL PM2.5)相比,各剂量PM2.5处理鼻黏膜上皮细胞24h和48 h后,细胞活性均降低,且细胞活性与PM2.5剂量呈负相关.与阴性对照组相比,200 μg/mL PM2.5组,细胞形态及细胞间occludin蛋白分布表达无明显改变;400 μg/mL PM2.5组,细胞形态变为梭形,细胞间隙增宽;500 μg/mL PM2.5组,细胞数量明显减少,细胞形态变为长梭形,细胞间隙增宽明显;除200 μg/mL PM2.5处理细胞24h外,其余各组细胞occludin mRNA及蛋白水平均下调,且occludin蛋白表达水平呈时间依赖性.结论 PM2.5可降低正常人HNEpC鼻黏膜上皮细胞活性、降低occludin的表达和分布.
鼻黏膜上皮细胞、细颗粒物(PM2.5)、闭合蛋白(occludin)、细胞连接
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R392-33;R714.253
中国博士后科学基金2016M591413;山西省软科学研究计划2018041032-5
2019-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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