抗棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)小鼠多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的 原核表达棉铃虫Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)并制备其多克隆抗体.方法 在大肠杆菌中表达组蛋白-HaCHT4融合蛋白(His-HaCHT4),镍柱纯化目的蛋白,经足垫加皮下注射免疫小鼠.4次免疫后,用ELISA检测抗His-HaCHT4多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性.结果 成功纯化His-HaCHT4融合蛋白,小鼠抗His-HaCHT4的多克隆抗体的滴度高于1∶204 800.Western blot结果显示该抗体能与His-HaCHT4融合蛋白及棉铃虫体中的天然HaCHT4结合,但不能与黄粉虫的蛋白结合.结论 成功原核表达和纯化了His-HaCHT4,制备了特异性的鼠多克隆抗体.

关键词：棉铃虫、Ⅳ型几丁质酶(HaCHT4)、多克隆抗体、免疫特异性

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分类号：R392.11;R392-33;R384;S852.4+3

资助基金：国家自然科学基金31471781;新疆维吾尔自治区科学基金2016D01C042

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：845-849