抗人游离前列腺特异性抗原(f-PSA)单克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的 建立产生抗人游离前列腺特异抗原单克隆抗体(f-PSA mAb)的细胞株,获得抗体后建立抗人f-PSA化学发光免疫分析法(CLIA)并进行应用.方法 采用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗f-PSA mAb的细胞株,将细胞株用转瓶扩大培养并将上清液采用亲和纯化法获得抗体,ELISA测定抗体效价、特异性及表位,表面等离子共振法测抗体亲和力;建立双抗体夹心CLIA,采用标准曲线定量法对该体系进行分析性能评估,同时对426例临床血清样本进行检测[其中130例的总PSA水平在(4 ～ 10) ng/mL,为“诊断灰区”],评价该试剂与罗氏试剂的检测一致性.结果 获得抗人f-PSA mAb的杂交瘤细胞株(f-10-1、f-14-1).用f-10-1和f-14-1建立的CLIA的检测范围为(0.1～30) ng/mL,灵敏度为0.05 ng/mL,检测结果的相对偏差均在±5％内,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及结合态PSA (c-PSA)无交叉反应,该试剂与罗氏试剂相关系数达到0.99,灰区样本阳性符合率、阴性符合率、总符合率均高于90％.结论 成功制备了抗人f-PSA mAb,建立了特异性定量检测人f-PSA的双抗体夹心CLIA.

关键词：游离前列腺特异抗原(f-PSA)、前列腺癌、单克隆抗体、双抗体夹心化学发光法(CLIA)

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分类号：R737.25;R392.1;Q813.2;R446.61(肿瘤学)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金2572015BA05

在线出版日期：2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：839-844