程序性死亡蛋白1(PD-1)在转染的HEK293T细胞的表达和鉴定
目的 优化HEK293T细胞转染条件,比较程序性死亡蛋白1(PD-1)在不同真核载体的表达水平以高效获取目标蛋白.方法 设计L9(33)正交试验,对细胞转染条件进行优化;扩增人PD-1胞外段基因,构建PD-1重组蛋白表达载体,瞬时转染HEK293T细胞,通过ELISA、Western blot对pCMV3、pcDNA3.1和pMH3三种真核表达载体的蛋白表达水平进行比较.结果 PD-1胞外段蛋白编码序列成功构建到pcDNA3.1和pMH3真核表达载体上,目的蛋白成功表达.在最佳转染条件下,PD-1重组蛋白在pMH3中的表达量最高,其次为pCMV3、pcDNA3.1的表达量最低.结论 人PD-1胞外段蛋白在pMH3-PD1真核载体转染的HEK293T细胞中表达量最高.
HEK293T细胞、瞬时表达、真核表达载体、程序性死亡蛋白1(PD-1)、重组蛋白
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Q344+.13;Q512+.7;R392-33(遗传学分支学科)
四川省教育厅项目16ZA0180,16TD0022;泸州市科技计划项目2017LZXNYD-J26;西南医科大学重点项目[2016]47号
2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
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