人未成熟朗格汉斯细胞的分选及鉴定
目的 分离并鉴定健康人皮肤组织内未成熟状态的朗格汉斯细胞(LC).方法 把取得的人包皮组织剪成特定大小后采用分散酶Ⅰ (dispase Ⅰ)消化过夜,分离表皮和真皮;Ⅰ型胶原蛋白酶在37℃消化表皮组织2h并结合摇床振荡制成单细胞悬液,通过特异性的分子标志物,应用流式细胞仪分选获得人CD3-CD14-CD1a+CD45+LC,采用免疫荧光技术检测CD207的表达对其进行鉴定,并用台盼蓝染色检测其活力.结果 分选得到未成熟LC,纯度为91.31%,平均存活率为93.16%.结论 成功分选获得活力好、纯度高的未成熟人LC.
人朗格汉斯细胞、流式细胞仪、免疫荧光鉴定
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R392.12;R392-33;R322.99+1
国家自然科学基金31670173;中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目2016-I2M-1-019;云南省重大专项2017ZF020;云南省科学技术厅资助项目2017ZF006
2019-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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