严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建

摘要：

目的 构建人源性严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)单链抗体(scFv)文库,并用SFTSV颗粒对文库进行初步筛选.方法 提取8例SFTS恢复期患者外周血淋巴细胞的总RNA,逆转录为cDNA;并以此为模板PCR扩增人源抗体轻链库(Vκ和Vλ)和重链库(VH),再经过重叠PCR随机拼接成scFv基因文库,最后克隆入噬菌粒载体pComb3XSS中,将重组噬菌粒电转化感受态XL1-Blue细胞,得到SFTSV抗体文库,检测文库库容及多样性,并用SFTSV颗粒作抗原对抗体文库进行初步筛选.结果 构建的人源SFTSV抗体文库的库容为2.8×10 7,测序结果表明文库多样性好,经过初步筛选获得21个克隆的人源化scFv,具有与SFTSV颗粒结合的活性.结论 成功构建了人源抗SFTSV的scFv文库.

关键词：严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)、人源抗体文库、单链抗体(scFv)

所属期刊栏目：34

分类号：R392.1;Q344+.13;Q78

资助基金：国家自然科学基金31570926

在线出版日期：2018-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：390-394