多重间接免疫荧光技术的建立及其在肝癌样本多种抗原检测中的应用
目的 建立一种适合在肝癌组织同一冰冻切片上同时检测多种蛋白的多重间接免疫荧光染色法.方法 用间接免疫荧光法联合激光扫描共聚焦显微镜技术对肝癌组织第一组4种蛋白进行染色和图像采集;用同源种属IgG Fab抗体封闭;联合化学试剂(β巯基乙醇/十二烷基苯磺酸钠/盐酸胍/氢硼酸钠)清除法洗脱染料和抗体;再次对第二组4种蛋白进行染色和成像;用软件叠加两轮图像染色结果.结果 激光光谱分离技术可以实现多达8种蛋白的共染结果;IgG Fab抗体可以封闭非特异性染色;联合化学合剂清除第一轮抗体后,可在同一切片中进行第二轮染色.结论 成功建立了在同一肿瘤组织标本同时检测多重标志物的方法.
多重间接免疫荧光、激光共聚焦荧光显微镜、冰冻切片
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R392-33;R446.61
国家“863”计划2015AA020403;国家自然科学基金81372594;北京市自然科学基金7182030;北京大学临床肿瘤学院科学研究基金10-29
2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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