上皮细胞黏附分子抗体杂交瘤细胞RP-PCR产物中的可变区假轻链基因序列的鉴定和去除
目的 发现制备上皮细胞黏附分子(EpCAM)基因工程抗体时,在SP2/0细胞出现的假轻链并去除.方法 从EpCAM单克隆抗体的杂交瘤细胞中逆转录提取RNA后,采用特定引物对目的序列进行PCR扩增,对扩增产物利用BCIⅥ限制性核酸内切酶进行酶切筛选,对酶切产物进行测序.结果 来源于SP2/0细胞的EpCAM单克隆抗体杂交瘤细胞中存在异常抗体轻链序列(假轻链基因),特异的酶切可以筛选出有效的轻链基因序列.结论 酶切法可以去除EpCAM基因工程抗体杂交瘤细胞中的假轻链基因,为消除针对EpCAM的基因工程抗体制备中的假轻链提供了可靠的方法.
上皮细胞黏附分子、假轻链、抗体制备
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R392.1;Q812;S852.4+3
国家自然科学基金81401338;陕西省基础研究计划2016JM3032
2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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