山姜素促进过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)与甲基转移酶结合
目的 通过筛选小鼠RAW246.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激活后的核定位结合特异性甲基转移酶,初步验证山姜素可通过激活PPAR引起表观遗传修饰效应.方法 RAW246.7细胞按照不同处理分为对照组、(100、200、500、1000) μg/mL山姜素处理组、1000 μg/mL山姜素联合0.1 mmol/mL GW9662处理组.孵育完成后,首先在String生物信息数据库检索与PPAR作用的甲基转移酶类,再利用免疫共沉淀技术筛选与RAW246.7核内PPAR作用的特异甲基转移酶,荧光定量PCR法验证山姜素对上述甲基转移酶合成的作用.结果 免疫共沉淀结果显示山姜素呈剂量依赖性促进胞核内甲基转移酶Zeste基因增强子同源物2(EZH2)、DNA甲基转移酶3α(DNMT3α)以及胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)与PPAR结合,与String数据库预测的互相作用蛋白情况基本吻合,且GW9662组中无甲基转移酶与PPAR作用;荧光定量PCR显示仅1000 μg/mL高剂量山姜素可促进TDG mRNA合成,而对DNMT3A以及EZH2 mRNA含量无显著影响.结论 PPAR激动剂山姜素可易化相关甲基转移酶与PPAR结合或诱导酶合成,提示山姜素具有潜在的甲基化修饰效应.
山姜素、鼠巨噬细胞、过氧化物酶体增殖物激活受体、甲基转移酶
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R392-33;R285.5
湖南省教育厅科研项目17C1144
2018-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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