抗鸭坦布苏病毒非结构蛋白1(NS1)多克隆抗体的制备和应用
目的 原核表达鸭坦布苏病毒(DTMUV)非结构蛋白1(NS1)蛋白,并制备小鼠抗NS1多克隆抗体.方法 利用PCR从DTMUV AH-F10株cDNA中获得NS1基因,亚克隆至pET-32a中进行原核表达,对表达产物进行鉴定.使用含尿素的Tris缓冲液洗去杂蛋白再梯度复性,纯化重组蛋白,并免疫小鼠制备小鼠抗NS1多克隆抗体,琼脂扩散试验测定抗体效价,Western blot法鉴定该抗体的特异性与反应原性,将抗体应用于病毒的间接免疫荧光法(IFA)检测.结果 获得鼠抗NS1蛋白多克隆抗体,效价达到1∶8;Western blot结果表明该多抗血清具有良好的特异性和反应性,且可以应用于病毒的IFA检测.结论 成功制备了鼠抗NS1多克隆抗体.
鸭坦布苏病毒、非结构蛋白1(NS1)、多克隆抗体、原核表达
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S852.4+3;S834;R392-33(动物医学(兽医学))
国家重点研发计划科研专项2016YFD0500805;兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室专项SYZD2017002
2018-01-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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