大鼠骨髓间充质干细胞来源的胞外囊泡分离和鉴定
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞来源的胞外囊泡(BMSC-EV)的分离、鉴定及-80℃冻存对BMSC-EV膜结构完整性的影响.方法 应用超高速离心法从大鼠BMSC培养上清液(BMSC-CS)中分离并纯化EV,扫描电镜和透射电镜观察其大小和形态;Western blot法检测EV标志性蛋白CD63的表达;-80℃冻存后,不同时间段通过透射电镜观察EV膜结构的完整性.结果 扫描电镜观察BMSC表面附着有大量膜结构的EV,形态呈圆形或椭圆形,直径约50～1000 nm;透射电镜观察BMSC-EV具有膜结构,形态和大小与扫描电镜结果一致;Western blot结果表明,BMSC-EV表达CD63;-80℃冻存后,在第1个月和第3个月分别通过透射电镜观察BMSC-EV膜结构完整,而冻存第6个月BMSC-EV膜结构破裂.结论 成功提取了BMSC-EV,且随着冻存时间的延长,其膜结构完整性降低.
骨髓间充质干细胞、胞外囊泡、分离、鉴定
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R392-33;Q345+.22;Q24
江苏省社会发展项目BE2017697;江苏省“六大人才高峰”项目WSN-009;江苏省自然科学基金BK20141295;江苏省“333工程”项目BRA2014172;镇江市社会发展项目SH2015033;镇江市重点医学人才2014;江苏大学附属医院科技项目jdfyRC2015010;江苏省“六个一”工程LGY2016055;江苏大学医学临床科技发展基金JLY20160081
2018-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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