黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗体的制备和应用

摘要：

目的 制备兔抗人黑素瘤相关抗原D4 (MAGE-D4)多克隆抗体,鉴定其免疫学特性,并进行初步应用.方法 对构建的pMAL-C2/MAGE-D4重组质粒进行原核表达及纯化,获得MBP/MAGE-D4融合蛋白,并以此蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体.抗体经蛋白A凝胶柱亲和层析法纯化后,通过SDS-PAGE检测其纯度;间接ELISA、Western blot法检测抗体的效价及特异性;免疫组织化学染色法检测肺癌组织中MAGE-D4的表达及定位.结果 获得纯度较高的抗MAGE-D4多克隆抗体,ELISA检测抗体的效价为1∶256 000,Western blot法分析显示MAGE-D4多克隆抗体可特异性识别MAGE-D4重组蛋白,免疫组织化学结果表明,该抗体能识别肺癌组织中的内源性MAGE-D4蛋白,表达的阳性率为69.6％(17/23).结论 制备的MAGE-D4多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度.

关键词：黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)、多克隆抗体、肿瘤相关抗原

所属期刊栏目：33

分类号：R392.11;R739.5;R751.05

资助基金：国家自然科学地区基金81560408;广西高校科学技术研究项目KY2015YB058;广西医科大学青年科学基金GXMUYSF2014012

在线出版日期：2017-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：104-108