幽门螺杆菌σ54蛋白多克隆抗体的制备
目的 原核表达纯化幽门螺杆菌σ54蛋白,并制备σ54蛋白的多克隆抗体.方法 以幽门螺杆菌26695基因组为模板扩增完整的rpoN基因片段,并将其克隆到含有His标签编码序列的原核表达载体pTriExTM-4上,将重组质粒转化大肠杆菌JM109DE感受态细胞,在IPTG诱导下表达带有His标签的融合蛋白,利用His-Bind亲和柱进行蛋白的纯化,将纯化的蛋白辅以佐剂免疫家兔,制备σ54蛋白的多克隆抗体.结果 σ54蛋白在大肠杆菌JM109DE菌株中有较高表达,纯化后进行SDS-PAGE获得了与预期融合蛋白大小一致的单一条带.获得的σ54蛋白多克隆抗体具有较好的σ54蛋白结合性和特异性.结论 成功表达和纯化了σ54蛋白并制备了多克隆抗体.
幽门螺杆菌、σ54蛋白、原核表达、多克隆抗体
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R392-33;R392.11
2017-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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