鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2)单克隆抗体制备和鉴定
目的 制备特异性鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2)单克隆抗体(mAb).方法 反转录PCR扩增cChk2基因,将其克隆入原核表达质粒pGEX-4T-3中,在BL21(DE3)中经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经SDS-PAGE检测可溶性.用cChk2腹腔免疫BALB/c小鼠,利用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法检测抗血清;血清检测阳性后,取小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,利用IFA和有限稀释法筛选阳性单克隆杂交瘤细胞株.结果 cChk2主要以包涵体形式存在,多抗血清具有良好的效价,获得9株阳性杂交瘤细胞株,即1F4、2D9、2G1、3D9、3E3、4B5、4E2、5C9及5F7.结论 成功制备了特异性良好的cChk2 mAb.
鸡细胞周期检验点激酶2 (cChk2)、原核表达、单克隆抗体
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Q813.2;R392.11;R392-33(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金31472218,31572502;江苏省自然科学基金BK20140711;留学回国人员科研启动基金教外司留[2014]1685号;中央高校基本业务费Y0201300527,Y0201300526;江苏高校优势学科建设工程资助项目2010年度
2016-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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