SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用

摘要：

目的 研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用.方法 采用Rab7小干扰RNA(siRab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平.mCherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系.用3种SapM的突变体SapM △ARCA,SapM△FRED和SapM △CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系.结果 siRab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用.结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用.

关键词：分泌性酸性磷酸酶(SapM)、自噬、Rab7、融合

所属期刊栏目：32

分类号：R392-33;Q932;R378.91+1;R329.2+4

资助基金：国家自然科学基金81302524,81202294,81571528;安徽省科技攻关项目1604a0802091

在线出版日期：2016-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1178-1182