巨噬细胞过表达miR-125b促进其凋亡
目的 探讨肺结核患儿外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125b和靶基因Raf1原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF1)表达;观察miR-125b对巨噬细胞凋亡和细胞活力的调节.方法 收集和分离肺结核患儿和健康儿童的PBMC,采用荧光定量PCR检测miR-125b和RAF1的mRNA表达水平,Western blot法检测RAF1的蛋白水平.THP-1巨噬细胞分别转染miR-125b模拟物(miR-125b mimic)、阴性对照模拟物(NC-mimic)、miR-125b抑制物(miR-125b inhibitor)以及阴性对照抑制物(NC-inhibitor),共培养48 h;利用Western blot法检测THP-1巨噬细胞中RAF1表达,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞活力.结果 在结核患儿PBMC的miR-125b表达下调,RAF1的mRNA和蛋白水平都升高.在THP-1巨噬细胞中过表达miR-125b时,RAF1表达下调,促进巨噬细胞凋亡,降低细胞活力;在THP-1巨噬细胞中miR-125b表达被抑制时,RAF1表达升高,抑制巨噬细胞凋亡,提高细胞活力.结论 结核患儿PBMC中miR-125b水平降低,上调THP-1巨噬细胞miR-125b水平促进巨噬细胞凋亡并抑制细胞活力.
miR-125b、Raf1原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF1)、THP-1巨噬细胞、细胞凋亡
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R521;R392.12;Q255(结核病)
国家自然科学基金81071406;重庆市医学科研项目计划20142046
2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
958-962,967
