锌指蛋白146(RNF146)对吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用
目的 评价锌指蛋白146(RNF146)对化疗药吡柔比星引起的GC-1小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用.方法 采用1.0μg/mL吡柔比星处理的方法复制DNA损伤的小鼠GC-1精原细胞模型.构建小鼠rnf146慢病毒过表达载体pCDH-rnf146并包装rnf146过表达慢病毒,感染GC-1细胞上调rnf146的表达,Western blot验证过表达效率.评价RNF146对吡柔比星引起的GC-1细胞增殖抑制、凋亡增多及DNA损伤的保护作用.结果 成功构建了pCDH-rnf146重组质粒并包装具有良好感染效率的RNF146过表达慢病毒.溴脱氧尿苷(BrdU)掺入标记显示RNF146能够减轻吡柔比星引起的GC-1增殖抑制.原位末端转移酶标记技术(TUNEL)提示RNF146能够抑制吡柔比星诱导的GC-1细胞凋亡.彗星实验显示RNF146过表达能够有效保护吡柔比星作用下GC-1细胞DNA的完整性.结论 RNF146对化疗药吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞损伤具有保护作用.
锌指蛋白146(RNF146)、过表达慢病毒、GC-1细胞系、吡柔比星、DNA损伤
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R392-33;R965;Q255
国家自然科学基金81460478,81260203,31460255,81360408
2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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