IL-12通过AKT/mTOR/STAT3信号通路诱导肝癌细胞自噬
目的 探讨白细胞介素12(IL-12)对HepG2和SMMC-7721肝癌细胞自噬的影响及其可能的作用机制.方法 10 ng/mL 的IL-12处理肝癌细胞6h,通过Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3)和Beclin 1以及相关信号通路蛋白:蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)磷酸化水平的变化,免疫荧光技术及透射电镜观察细胞自噬的发生情况;使用STATHC或siSTAT3抑制STAT3的活性以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)活化AKT之后,再次观察IL-12诱导细胞自噬的变化情况.10 ng/mL的IL-12处理肝癌细胞1、2、3、4、5d,CCK-8法检测细胞的增殖;10 ng/mL的IL-12处理肝癌细胞48 h,台盼蓝染色检测细胞死亡率;利用小干扰RNA (siRNA)沉默Beclin 1基因抑制自噬后,再次用CCK-8法和台盼蓝染色法检测IL-12对肝癌细胞增殖和死亡的影响.结果 IL-12能够诱导肝癌细胞发生自噬,抑制其增殖,降低其存活率;siRNA沉默Beclin 1基因后,细胞存活率降低;IL-12处理后p-AKT、p-mTOR、p-STAT3水平都显著降低;STATHC预处理可增强IL-12诱导的细胞自噬,而IGF-1预处理后,IL-12诱导的细胞自噬减弱.结论 IL-12通过抑制AKT/mTOR/STAT3信号通路来诱导HepG2和SMMC-7721肝癌细胞发生自噬,该自噬可减弱IL-12抑制肝癌增殖的能力.
白细胞介素12(IL-12)、自噬、细胞增殖、STAT3、HepG2细胞、SMMC-7721细胞
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R392;R735.7
国家自然科学基金81172016
2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
870-875
