三基序蛋白34(TRIM34)与微核染色体共定位并阻碍染色体在有丝分裂中期向赤道板的移动
目的 观察三基序蛋白34(TRIM34)与微核是否存在共定位关系,及对微核染色体在有丝分裂时移动的影响.方法 构建并鉴定TRIM34-pEGFP-N3真核表达载体,转染TRIM34-pEGFP-N3载体至HEK293T细胞,经4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,用荧光显微镜观察TRIM34与微核间是否存在共定位关系.通过激光共聚焦显微镜技术结合MitoTracker(R) Deep Red线粒体示踪剂,进一步明确TRIM34、微核与线粒体间的位置关系.观察TRIM34-微核结合体在HEK293T细胞有丝分裂中期与赤道板的位置关系.结果 经测序鉴定,成功构建TRIM34-pEGFP-N3真核表达载体.TRIM34-pEGFP-N3载体转染HEK293T细胞后,通过荧光显微镜发现TRIM34与微核可能存在共定位关系.经激光共聚焦显微镜技术进行后续检测发现,存在共定位关系的TRIM34小体与微核间在外形上较一致.TRIM34-微核结合体与线粒体未见明显的共定位关系.在有丝分裂中期,结合TRIM34的微核染色体不能移动至赤道板.结论 TRIM34可以结合微核染色体,阻碍后者在有丝分裂中期向赤道板的移动.
微核、染色体破碎、TRIM34
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R392.11;Q291;Q786
山东省自然科学基金ZR2012CM009;山东省科技发展计划2011YD18015;山东省高等学校科技计划J11LF89;滨州医学院附属医院青年科研基金2013QNKYJJ02
2016-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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