丙型肝炎病毒河北株E2蛋白胞外核心区的真核表达及应用

摘要：

目的 真核细胞表达丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心区(E2c)并利用E2c蛋白检测HCV患者血清中特异性抗E2蛋白抗体水平.方法 以HCV1b型(河北株)基因序列为基础,设计HCV1b E2c基因序列并通过基因拼接的方法合成;将含有组织型纤溶酶原激活物(tPA)信号肽的E2c扩增产物克隆入pCI-neo真核表达载体,获得pCI-tpa-1bE2c载体;将pCI-tpa-1bE2c真核表达载体转染HEK293T细胞,收集细胞上清后进行浓缩及纯化,Western blot法鉴定蛋白特异性;以获得E2c蛋白为抗原,建立基于雪花莲凝集素(GNA)的改良ELISA检测HCV患者血清特异性抗E2c抗体水平.结果 成功利用真核表达系统表达获得E2c蛋白,建立了GNA改良ELISA检测HCV患者血清中抗E2蛋白抗体的方法.结论 成功在HEK293T细胞表达HCV-1bE2c蛋白并进行了临床应用.

关键词：丙型肝炎病毒(HCV)、E2蛋白胞外核心区(E2c)蛋白、真核表达、基于雪花莲凝集素的改良ELISA

所属期刊栏目：32

分类号：R512.6+3;R392-33;R446.61(传染病)

资助基金：十二五传染病重大专项2013ZX10004609

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：746-749