冠蛋白1参与分枝菌酸诱导巨噬细胞的泡沫化
目的 研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制.方法 根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7和RAW264.7-Cor.Minus三组.各组细胞经100 μg/mLMA包被的聚苯乙烯微球作用24h后提取总蛋白,用Western blot法检测细胞冠蛋白1的表达水平.分别用(0、25、50、75、100) μg/mL MA包被聚苯乙烯微球作为吞噬颗粒,在2μmol/L松胞菌素D(ctyD)处理前、后,分别吞噬24h～8d,用总胆固醇(TC)酶法测定试剂盒、游离胆固醇(FC)酶法测定试剂盒分别检测各组细胞TC、FC,再通过胆固醇酯(CE)和CE/TC比值定量评估巨噬细胞泡沫化水平.将ctyD处理细胞(RAW264.7-ctyD、RAW264.7-ctyD-MA)及其对照组分别用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率.结果 各组细胞受MA诱导后,其冠蛋白1的表达量显著高于相应对照组,其表达量从高至低依次为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7、RAW264.7-Cor.Minus.表达不同水平冠蛋白1的各组细胞的泡沫化水平与MA包被剂量和MA作用时间呈正比;冠蛋白1表达量最高的RAW264.7-Cor.Plus细胞泡沫化水平最高,冠蛋白1表达量最低的RAW264.7-Cor.Minus细胞泡沫化水平最低;ctyD抑制巨噬细胞F-actin显著降低MA诱导的细胞泡沫化水平,但抑制F-actin对冠蛋白1与MA诱导细胞泡沫化的正相关性并无显著影响;经鬼笔环肽染色后,MA诱导组细胞的F-actin重排率显著高于非MA诱导的对照组细胞.结论 MA可诱导巨噬细胞冠蛋白1的表达,其表达水平与MA诱导的细胞泡沫化呈正相关,F-actin参与MA诱导的细胞泡沫化过程,但F-actin并非冠蛋白1调控MA诱导细胞泡沫化的关键和唯一途径.
巨噬细胞、冠蛋白1(coronin-1)、分枝菌酸、泡沫细胞、纤维型肌动蛋白(F-actin)
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R392.12;Q954.62;R378.91+1
重庆市科委自然科学基金cstc2012jjA10033
2016-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
451-456
