含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶2(ADAMTS2)多克隆抗体的制备

摘要：

目的 原核表达并纯化小鼠源性含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶2(ADAMTS2)蛋白的C段(1109-1213),制备兔抗ADAMTS2多克隆抗体.方法 以重组质粒pGEX-6p-1-ADAMTS2 (1109-1213)转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过亲和纯化,并且经质谱鉴定;以表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗ADAMTS2的多克隆抗体.ELISA检测抗体效价,Western blot法鉴定抗体特异性.结果 在大肠杆菌中表达出目的蛋白ADAMTS2,纯化后经质谱鉴定并免疫新西兰大白兔,成功获得抗血清.血清效价达到1:160000以上,且具有良好的特异性.结论 成功制备出效价高、特异性好的兔抗ADAMTS2抗体.

关键词：ADAMTS2、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：32

分类号：R392.11;Q786

资助基金：国家自然科学基金31401273;国家重大科学研究计划2012CB944902

在线出版日期：2016-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：393-396,401