miR-126敲减增强小鼠CD4+T细胞体内活性并促进其向Th1细胞分化
目的 观察miR-126基因敲减(KD)小鼠体内CD4+T细胞活性的变化并探讨其意义.方法 利用磁珠活化细胞分选技术(MACS)分选miR-126KD小鼠脾脏CD4+ CD62L+T细胞,实时定量PCR检测细胞内miR-126成熟体的表达水平;荧光激活细胞分选术(FACS)检测CD4+T细胞表面活化标志CD69、CD62L和CD44分子以及Ki-67的表达变化;膜联素V/碘化丙啶(annexin V/PI)双染色法结合流式细胞术检测CD4+T细胞的凋亡情况;实时定量PCR检测CD4+T细胞功能相关细胞因子白细胞介素4(IL-4)、IL-10、IL-12、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-o)、γ干扰素(IFN-γ)的mRNA水平变化.结果 与野生型(WT)小鼠组相比,miR-126KD小鼠组CD4+T细胞内miR-126成熟体的表达显著下调;FACS结果显示miR-126KD小鼠CD4+T细胞表达CD62L的比例明显减少,而表达CD69、CD44以及Ki-67细胞的比例显著增加,CD4+T细胞的体内凋亡比例显著减少;CD4+T细胞中IL-4、IL-10的mRNA水平明显降低,而IL-12、TGF-β、TNF-α以及IFN-γ的mRNA水平显著增加.结论 miR-126KD小鼠体内CD4+T细胞的活性显著增强并促进其向Th1细胞分化.
微小RNA-126、基因敲减、CD4+T细胞、活性、细胞因子
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R392.11;R392.12;Q254
国家自然科学基金31370918;教育部新世纪优秀人才计划NCET-12-0661
2016-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
347-351