人脐静脉内皮细胞分离培养和鉴定
目的 建立简便、可靠、高效的体外分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的方法.方法 利用2型胶原蛋白酶消化处理脐带分离HUVEC,采用内皮细胞培养基(ECM)进行培养.相差倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光技术检测冯·维勒布兰德因子(vWF)的表达,流式细胞术检测细胞表面CD31的水平鉴定细胞的纯度,体外成管实验检测冻存后内皮细胞的功能.结果 成功分离培养出纯度高、活性好的HUVEC.原代HUVEC分离1周即可汇合成单层,细胞呈典型的鹅卵石状排列,免疫荧光技术证明细胞广泛表达vWF、CD31阳性细胞频数达93.1%.冻存后的细胞依然能形成管腔结构,证明标准化的冻存方法能很好地维持细胞的功能.结论 建立了简便、可靠、高效的体外分离培养HUVEC的方法.
人脐静脉、内皮细胞、培养鉴定、血管新生
32
R392-33;Q813.1+1
国家自然科学基金81160026
2016-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
328-331